Neuropeptido Y (NPY) aptikimas visų pirma priklauso nuo imunologinių metodų, įskaitant fermentų -susietą imunosorbento tyrimą (ELISA), skirtą kiekybinei analizei, ir imunohistochemiją (IHC) audinių lokalizavimui.
ELISA yra dažniausiai naudojamas metodas kiekybiniam NPY kiekiui biologiniuose mėginiuose, tokiuose kaip žmogaus serumas, plazma, audinių homogenatai, ląstelių lizatai ir ląstelių kultūros supernatantai, nustatyti. Paprastai taiko konkurencinio slopinimo principą: NPY monokloniniai antikūnai padengiami ant mikroplokštelės ir pridedamas ir biotinu -pažymėtas antigenas, ir mėginys, kuriame yra tikslinio antigeno. Tikslinis antigenas konkuruoja su pažymėtu antigenu dėl prisijungimo prie antikūnų. Po plovimo etapo spalvai išryškinti pridedamas HRP-pažymėtas avidinas ir substratas TMB; spalvos intensyvumas yra atvirkščiai proporcingas NPY koncentracijai mėginyje. Šis metodas pasižymi dideliu jautrumu ir specifiškumu, o įprastas aptikimo diapazonas yra nuo 24,69 pg/mL iki 2000 pg/mL, o apatinė aptikimo riba yra mažesnė nei 9,59 pg/mL.
IHC naudojamas lokalizuoti NPY ekspresiją ir pasiskirstymą audinių skyriuose. Naudojant specifinius antikūnus, kurie jungiasi prie NPY audinyje, ir naudojant chromogeninę reakciją vizualizacijai, šis metodas įgalina kokybinę arba pusiau-kiekybinę NPY ekspresijos analizę skirtinguose audiniuose.
